Formé à l’École-Théâtre de la Belle de Mai à Marseille, Pierre Louis-Calixte débute au sein de la Compagnie Carcara où il interprète des auteurs tels que Michel Vinaver, Louis Calaferte, Lothar Trolle ou Heiner Müller. En 2001, il est dirigé par Sylvain Maurice dans le rôle-titre de Macbeth de Shakespeare, et par Nicolas Fleury dans Pinocchio d’après Carlo Collodi.

Il entre à la Comédie-Française en 2006 et en devient le 524ᵉ sociétaire en 2013.
Pierre-Louis Calixte fait ses premiers pas Salle Richelieu dans le rôle de Cléante dans Tartuffe de Molière, sous la direction de Marcel Bozonnet. Il joue ensuite La Flèche dans L’Avare, Trissotin dans Les Femmes savantes, Alain dans L’École des femmes, Gusman dans Dom Juan. En 2022, il crée un seul-en-scène intitulé Molière / Matériaux, un texte écrit à partir de souvenirs personnels et de matériaux fictionnels publié chez Actes Sud.

Présent dans de nombreuses mises en scène du répertoire classique, il incarne notamment Le Bret dans Cyrano de Bergerac de Rostand et Jeppo Liveretto dans Lucrèce Borgia de Victor Hugo mis en scène par Denis Podalydès. Il joue Tranio dans La Mégère apprivoisée par Oskaras Koršunovas, Pistolet dans Les Joyeuses Commères de Windsor par Andrés Lima, et Macduff dans Macbeth par Silvia Costa. Il interprète aussi Mercutio dans Roméo et Juliette,mis en scène par Éric Ruf.

Son parcours s’étend aussi au théâtre contemporain, avec la pièce écrite pour la Troupe et mise en scène par l’autrice Christine Montalbetti La Conférence des objets, ainsi que Je reviens de loin de Claudine Galea, L’Ordinaire de Michel Vinaver, La Maladie de la famille M. de Fausto Paravidino, La Mer d’Edward Bond ou encore Construire un feu de Jack London ou Haute surveillance de Jean Genet.

Au cinéma, il tourne sous la direction de Patrick Mille, Alain Guiraudie et François Ozon.