À sa sortie du Conservatoire national supérieur d’art dramatique de Paris, Alain Lenglet joue sous la direction de Jacques Rosner, Daniel Mesguich, Guy Rétoré, Richard Demarcy ou Augusto Boal et fait partie de la compagnie de Laurent Terzieff et de celle du Chapeau Rouge de Pierre Pradinas. En 1993, il est engagé en tant que pensionnaire à la Comédie-Française et en devient le 502e sociétaire en 2000.

S’il a maintes fois joué des personnages emblématiques des comédies de Molière – Béralde dans Le Malade imaginaire, Monsieur de Sotenville dans George Dandin, Clitandre des Femmes savantes, Ariste de L’École des maris, Anselme dans L’Avare ou encore le rôle-titre dans Sganarelle ou le Cocu imaginaire –, Alain Lenglet participe à nombreuses pièces de troupe, naviguant entre les univers d’auteurs tels que Marivaux, Corneille, Racine, Tchekhov, Norén, Wedekind, Gogol ainsi qu’à de multiples reprises Shakespeare, interprétant Sébastien dans La Tempête par Daniel Meguich, Baptista dans La Mégère apprivoisée par Oskaras Koršunovas, Horatio dans La Tragédie d’Hamlet par Dan Jemmett, Duncan dans Macbeth par Silvia Costa ou encore Montaigu dans Roméo et Juliette par Éric Ruf, avec lequel il participe dernièrement à l’aventure du Soulier de satin de Claudel.

Séduit par les formes originales, il comet en scène, avec Marc Fayet, Christian Gonon dans La seule certitude que j’ai, c’est d’être dans le doute de Desproges, joue pour Christophe Montenez et Jules Sagot dans leur pièce Et si c’étaient eux ?, Marie Rémond dans Le Voyage de G. Mastorna d’après Fellini, Jeanne Herry dans Forums et endosse le rôle de Gepetto dans Pinocchio créature, une adaptation du roman de Collodi par Sophie Bricaire.

Au cinéma, Alain Lenglet est fidèle à Robert Guédiguian et on a pu également le voir dans Pupille de Jeanne Herry.